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細胞養不好?這些注意事項請收好

  • 發布日期:2020-11-23      瀏覽次數:1317
    •   細胞養不好?這些注意事項請收好
        1、購買的細胞死亡或存活率不佳可能原因?細胞冷凍管解凍后,為何會有細胞數目太少的情形?
        研究人員在細胞培養時出現存活率不佳,常見原因可歸納為:培養基使用錯誤或培養基品質不佳;血清使用錯誤或血清的品質不佳;解凍過程錯誤;冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心;懸浮細胞誤認為死細胞;培養溫度使用錯誤;細胞置于–80℃太久。
        研究人員在冷凍細胞培養時出現細胞數目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養基即可。
        2、收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落的原因?
        冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,是因熱脹冷縮的物理現象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
        3、如何選用特殊細胞系培養基?
        培養某一類型細胞沒有固定的培養條件。在MEM中培養的細胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長。總之,優選MEM做粘附細胞培養,RPMI-1640做懸浮細胞培養是一個好的開始,各種目的無血清培養*好優選AIMV(12005)培養基(SFM)。
        4、L-谷氨酰胺在細胞培養中重要嗎?它在溶液中不穩定嗎?
        L-谷氨酰胺在細胞培養時是重要的。脫掉氨基后,L-谷氨酰胺可作為培養細胞的能量來源、參與蛋白質的合成和核酸代謝。L-谷氨酰胺在溶液中經過一段時間后會降解,但是確切的降解率一直沒有*終定論。L-谷氨酰胺的降解導致氨的形成,而氨對于一些細胞具有毒性。
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